ELISA analiza: transkript

Enzimski imunski test (ELISA) je metoda testiranja krvi v laboratoriju, ki temelji na iskanju posebnih celic - protiteles proti različnim boleznim. Metoda ne omogoča le identifikacije patogena, ampak tudi ugotovitev, na kateri stopnji je patološki proces. Slednje je zelo pomembno za prognozo in nadaljnje zdravljenje bolnika.

Prednosti in slabosti metode

Med vsemi sodobnimi diagnostičnimi metodami je ELISA najbolj inovativna in tehnično natančna. Njegove glavne prednosti so:

1. Sposobnost iskanja vseh obstoječih protiteles proti nalezljivim boleznim v krvi pacienta.
2. Visoka razpoložljivost raziskovalne metode. Do danes lahko vsak laboratorij srednjega razreda opravi analize ELISA.
3. Skoraj 100% specifičnost in občutljivost metode.
4. Sposobnost iskanja protiteles in antigenov ter ugotavljanje stopnje patološkega procesa in sledenje njegove dinamike zaradi primerjave števila.

Takšne številne prednosti v primerjavi z drugimi testi popolnoma zasenčijo eno samo pomanjkljivost analize: lahko zazna protitelesa, ne pa tudi samega patogena.

Ključni pojmi za vrednotenje analize

Da bi razumeli, kaj se dogaja z analizo ELISA, kaj je in kako se izvaja, se morate seznaniti z osnovnimi pojmi, ki jih uporabljajo strokovnjaki.

1. Protitelo je beljakovina, ki jo proizvajajo celice. imunski sistem človeških (limfociti tipa B). Odzivajo se s posebno reakcijo na zaužitje tujega sredstva ali snovi. Drugo ime za protitelesa so imunoglobulini, ki pripadajo različnim razredom: A, E, M, G. Medsebojno se razlikujejo po masi, hitrosti odziva, razpolovnem času in številnih drugih značilnostih. Običajno človeška kri vsebuje predvsem imunoglobuline razreda G. Če pride do okužbe, se število imunoglobulinov A in M ​​močno poveča. Imunoglobulini E sodelujejo pri alergijskih reakcijah.
2. Antigen je tuje sredstvo organskega izvora in visoka molekulska masa. Najpogosteje predstavlja patogene ali njihove biološko aktivne snovi.
3. Kompleks antigen-protitelo ali imunski kompleks je neposredna kombinacija tuje snovi in ​​imunoglobulina, ki povzroči imunski odziv.

Bistvo in obseg metode

Bolniki imajo pogosto vprašanje: ELISA, kaj je, kako se izvaja in za kaj je? O metodi lahko na kratko opišete njene faze.

Pripravljalna faza . Laboratorijski zdravnik uporablja posebno tableto, v kateri je 96 lukenj. Na površino vsake vdolbinice je bil nanešen antigen določenega patogena.

Faza 1. Izvede se vzorčenje krvi, ki se nato po kapljici nanese na vodnjak. V jedru se sproži reakcija med antigenom in protitelesom v krvi.

Faza 2. V vrtini poteka reakcija z nastankom imunskih kompleksov. Rezultat je snov določene barve. Intenzivnost obarvanja je odvisna od količine protiteles v krvi pacienta do vsakega specifičnega patogena.

Faza 3. Vrednotenje rezultata s fotometrijo. V ta namen uporabite posebno napravo, imenovano "spektrofotometer". Uporablja se za primerjavo gostote materiala v vrtini in kontrolnega vzorca. Nato naprava ustvari rezultat z matematično analizo.

Vrednotenje rezultatov in namen ELISA

Razlaga rezultata je odvisna od več pomembnih odtenkov:

1. Vodnjaki z optično gostoto
2. Proizvajalec plošč z luknjami (preskusni sistemi).
3. Laboratorij, v katerem je bila opravljena študija.

Glede na te nianse ne smete nikoli primerjati dveh rezultatov iz različnih testnih sistemov ali iz različnih laboratorijev.

Druga pomembna točka, ki vpliva na analizo ELISA, je tako imenovana avidnost protiteles. Ta parameter označuje količino antigena, moč vezi v kompleksu "antigen-protitelo". Osnova njegove definicije je obdelava sečninskega imunskega kompleksa z namenom razreševanja proteinskih struktur. To vam omogoča, da uničite šibke vezi med antigenom in protitelesom in pustite le močno. Vrednost raziskav avidnosti je, da jo lahko uporabimo za ugotavljanje trajanja okužbe. Te informacije so zelo pomembne za diagnozo nosečnic.

Krvni test z ELISA je:

1. Iskanje različnih patogenskih antigenov.
2. Za preučevanje hormonskih ravni.
3. Za pregled prisotnosti avtoimunske patologije.
4. Za odkrivanje označevalcev raka.

Sorte ELISA

Analiza ELISA ima naslednje sorte:

1. Posredna.
2. Neposredno.
3. Konkurenčno.
4. Metoda blokiranja

Pravzaprav je danes uporabljena samo metoda, imenovana ELISA (encimsko vezana imunska analiza). Temelji na zgoraj opisani reakciji nastanka kompleksa antigena s protitelesom s spremembo barve na površini vodnjaka.

Kvantitativni test ELISA za kri zasluži posebno pozornost. To ni vrsta analize, ampak način vrednotenja rezultatov. Zahvaljujoč njemu se šteje število protiteles in določajo njihovi razredi. Rezultat je odvisen od optične gostote vzorca, preskusnega sistema, na katerem je bil opravljen test ELISA, in od laboratorija.

Bolezni, odkrite s testom ELISA

ELISA je krvni test, ki vam omogoča identifikacijo velikega števila različnih nalezljivih bolezni. Poleg tega se z enako natančnostjo odkrijejo virusne in bakterijske bolezni. Na primer, z uporabo imunskih kompleksov se lahko dokaže prisotnost antigenov povzročiteljev naslednjih bolezni:

1. Virusni hepatitis A, B in C.
2. Okužbe z virusom HIV in AIDS.
3. Epstein-Barr virus.
4. Herpes virus vseh vrst.
5. Citomegalovirus.
6. Corey
7. Toksoplazmoza.
8. Sifilis in številne spolno prenosljive bolezni (SPB).
9. Parazitoza in druge bolezni.

Poleg tega lahko ELISA zazna:

1. Označevalci raka - TNF (faktor tumorske nekroze), PSA (antigen, specifičen za prostate), CEA (antigen antigena raka), CA-125 (tumor jajčnikov)
2. Nosečnost Hormon - hCG (horionski gonadotropin).
3. Bolezni reproduktivnega sistema: hormoni ženskega in moškega reproduktivnega sistema.
4. Patologija ščitnice.

Pomembno je omeniti, da je ELISA test za HIV danes glavni način za diagnosticiranje te nevarne bolezni.

Material za tehnologijo ELISA in ograjo

Za izvedbo testa ELISA pri bolniku se odvzame kri na prazen želodec. Nadalje je serum pridobljen iz krvi, ki se neposredno uporablja za analizo. Poleg tega se lahko ELISA izvaja na cerebrospinalni tekočini (CSF), sluz materničnega vratu kanal (cerviks), plodna tekočina in celo steklasto tekočino (zrkla).

Pred dajanjem krvi bolniku so opozorjeni, da ne sme jemati nobenih zdravil, zato je priporočljivo, da zdravljenje zaključite z antibiotiki in protivirusnimi zdravili vsaj dva tedna pred odvzemom krvi.

Čas prejema in razlage rezultatov

Čas odziva laboratorija ni odvisen od hitrosti njegovega dela, ampak na kateri stopnji je bolezen in katera protitelesa so se že pojavila v krvi. Tako se na primer: M imunoglobulini pojavijo približno 2 tedna po jemanju krvi za analizo in pomenijo, da je proces v fazi primarne okužbe ali da je prišlo do poslabšanja kronične. Istočasno se pojavijo protitelesa razredov M in G med primarno okužbo. Poleg tega je slednje mogoče odkriti po 4 tednih.

IgA se pojavi po 2-3 tednih bodisi samostojno ali z M, kar pomeni akutno okužbo ali G, kar kaže na kronični proces.

Takšna različna obdobja nastanka protiteles v krvi povzročijo, da pacient čaka dolgo časa na rezultat. Sprejemljivo je počakati več kot mesec dni po izvedbi testa ELISA. Dekodiranje in interpretacija s strani zdravnika traja tudi nekaj časa.