PCR diagnoza okužb: kako prestati teste. PCR diagnoza okužb: cene in pregledi laboratorijev

Vedno več v medicinski praksi začeli uporabljati novo metodo za diagnozo nalezljivih bolezni, ki ima okrajšavo PCR. Kaj je bistvo takšne metode raziskovanja in katere bolezni je mogoče identificirati zaradi nje, pa tudi prednosti PCR v primerjavi z drugimi običajnimi diagnostičnimi metodami in kako se ustrezno pripraviti na analizo, se lahko naučite z branjem tega članka.

Kaj je PCR?

Kratica PCR stoji za verižno reakcijo s polimerazo. To je sposobnost segmenta DNA, da se razmnožuje sorazmerno pod potrebnimi pogoji. Izmišljena PCR diagnoza okužb v osemdesetih letih. Na tem odkritju so delali evropski, ameriški in sovjetski znanstveniki, zato ni mogoče določiti prvotnega izumitelja inovativne diagnostične metode. Poleg tega se od leta 1983, ko je bil uradno registriran tak način proučevanja nalezljivih bolezni kot PCR, nadaljuje delo na izboljšanju te metode. Do danes se takšna diagnostična metoda uporablja v skoraj vsakem medicinskem laboratoriju s sodobno potrebno opremo.

Kako je analiza?

Za analizo PCR, odvisno od medicinskih indikacij, je treba opraviti medicinsko vzorčenje materialov, kot so kri, slina, urin, seme, materino mleko ali spolni izločki, epitelijske celice. Diagnoza okužb s PCR je odkrivanje DNA patogena v testnem materialu. S pomočjo posebnih laboratorijskih manipulacij z uporabo kemijskih reagentov in opreme laboratorijski tehniki izvajajo verižno reakcijo s polimerazo. S svojo pomočjo se patogenova nevidna DNK, ki je nevidna skozi mikroskop, v napravi razvije v opazne dimenzije. Zato je možno odkriti povzročitelja okužbe, čeprav je v preučevanem materialu majhen del njegove DNK.

Katere okužbe je mogoče odkriti s PCR?

Zaznava različne patogene mikroorganizme PCR diagnostiko okužb. Dekodiranje rezultatov se zmanjša na odkrivanje patogena in določitev njegovega tipa. S pomočjo verižne reakcije s polimerazo se diagnosticirajo različne človeške bolezni: od spolno prenosljivih okužb do asimptomatskih, tako imenovanih skritih okužb. Z uporabo PCR so:

• virus hepatitisa (A, B, C);
• ureplazma urealitikum;
• ureplazmu parvum;
• chlamydia trachomatis;
• Candida;
• mycoplasma hominis;
• mycoplasma genitalium;
• garganella vaginalis;
• trihomonaza;
• mikobakterija tuberkuloza;
• virus herpes simpleks tipa 1 in 2;
• virus papiloma;
• Virus Epshein-Barr;
• Helicobacter pylori;
• virus imunske pomanjkljivosti.

Zgoraj navedeni mikroorganizmi povzročajo bolezni, kot so hepatitis, tuberkuloza, SPO in AIDS.

PCR diagnostika okužb se izvaja v obliki kvalitativne (tj. Prisotnosti ali odsotnosti patogena) in kvantitativne analize (izračuna se količina mikrobov v telesu - ta pristop je potreben npr. Pri diagnozi okužb s HIV in hepatitisu).

Prednosti diagnostične metode

Praktično v vsakem laboratoriju danes diagnostiko okužb človeka izvajamo s polimerazno verižno reakcijo. Kakšne so prednosti takšne metode, zakaj je v tako kratkem času postala izjemno priljubljena tako med zdravniki kot med bolniki? Tako hitro širjenje inovativne tehnologije je mogoče pojasniti z visoko stopnjo zanesljivosti, učinkovitosti in občutljivosti. Oglejmo si podrobneje prednosti PCR diagnostične metode:

1. Proces analize je čim bolj avtomatiziran, kar odpravlja človeški dejavnik pri raziskovanju in dešifriranju rezultata.
2. Zaradi sodobnih tehnologij se pridelki gojijo za 4–6 ur, zato je rezultat analize mogoče dobiti na dan, ko so materiali predani za raziskave.
3. PCR diagnostika okužb je zelo občutljiva, kar omogoča odkrivanje patogena tudi v prisotnosti majhnega deleža DNA. V nekaterih primerih, na primer v primeru počasnih in asimptomatskih bolezni, je setev z drugo metodo težko ali popolnoma nemogoča.
4. Krv, slina, urogenitalni izločki, epitelijske celice, urin in sperma lahko postanejo material za testiranje PCR, kar je izjemno priročno, če ni mogoče vzeti določenega materiala za analizo. Za diagnozo nalezljivih bolezni običajno uporabljamo vensko kri in urogenitalni bris.
5. Metoda verižne reakcije s polimerazami lahko iz istega materiala določi več patogenov. Takšen pristop ne le skrajša čas za pravilno diagnozo, ampak tudi prihrani stroške raziskovanja.
6. Metoda PCR je zanesljiva, saj je bilo zabeleženih le majhno število lažno negativnih rezultatov. Do danes so bili zabeleženi lažno pozitivni odzivi.

Kdaj se uporablja PCR diagnostika?

Ne glede na prednosti PCR diagnostike okužb se ta metoda ne uporablja vedno. Na primer, pri diagnozi toksoplazmoze se verižna reakcija s polimerazo izvaja le, če ELISA analiza vprašljive ali sporne rezultate. Z uporabo metode PCR ni mogoče izslediti dinamike bolezni. Ugotavljamo naslednje primere, ko bo ta raziskovalna metoda prinesla zanesljive in učinkovite rezultate:

• za določitev zgoraj navedenih nalezljivih bolezni v ustreznem oddelku članka;
• PCR diagnostika urogenitalnih okužb je zelo razširjena;
• za določanje spolno prenosljivih bolezni med nosečnostjo;
• za diagnosticiranje HIV;
• v spornih zdravstvenih situacijah za potrditev ali zavrnitev predhodne diagnoze;
• določiti očetovstvo in sorodstvo;
• uporabljajo pri genotipizaciji za odkrivanje dednih predispozicij;
• Metoda PCR pomaga delavcem v oddelku za sodno medicino, da prepoznajo genski material.

PCR med nosečnostjo

Preiskava metode PCR je obvezna za nosečnico pri prijavi z namenom zgodnjega odkrivanja spolno prenosljivih okužb. Ker so takšne bolezni zelo nevarne za normalen potek otrokovega obdobja. SPO povzročajo bledi razvoj ploda, spontane splave, deformacije ploda, mrtvorojenost, prirojene nepravilnosti. Pravočasno zaznavanje in zdravljenje okužbe znatno poveča možnosti za ugoden izid nosečnosti in rojstvo zdravega otroka.

Običajno je nosečnici dodeljen celovit pregled, ki ima ime "PCR 6". Ta študija vključuje analizo 6 različnih okužb. PCR-diagnostiko izvajamo tako v državnih kot zasebnih ustanovah: “Invitro”, “Happy family”, “Uro-Pro” in drugi laboratoriji nudijo to storitev. To vprašanje je podrobneje opisano spodaj.

Zato bo treba za analizo vzeti material le enkrat. Pri izvajanju PCR diagnostike med nosečnostjo je potreben urogenitalni bris, ki ga iz cervikalnega kanala vzamemo z ginekološkim čopičem. Ta postopek pri nosečnicah ne povzroča bolečin in ne vpliva na plod.

PCR za določanje hepatitisa

Pogosto predpišejo PCR diagnostiko za odkrivanje povzročitelja hepatitisa. To je mogoče pojasniti z dejstvom, da je takšna bolezen pogosto asimptomatska in gre v kronično težko težko stanje. Z uporabo PCR se hepatitis določi v najzgodnejših fazah, kar prispeva k ugodnemu zdravljenju v najkrajšem možnem času. Takšna PCR diagnostika okužb se izvaja v večini zasebnih laboratorijev. Cena je odvisna od vrste odkritega virusa in vrste analize. Tako preprosta določitev prisotnosti ali odsotnosti DNA patogena v krvi stane 400–600 r. Kvantitativna metoda bo stala 1200-1500 str.

Celovita študija s PCR

Za še učinkovitejše rezultate metode PCR pri diagnosticiranju nalezljivih bolezni se pogosto uporablja obsežna študija, ki pomaga zmanjšati čas diagnoze in pravočasno zdravljenje. Tako laboratoriji nudijo analizo "PTSR-6" in "PTSR-12". Prvi kompleks vključuje PCR diagnostiko. genitalne okužbe kot so: t

• ureplazmoz;
• klamidija;
• mikoplazmoza;
• humani papiloma virus;
• herpes simpleks;
• citomegalovirus.

Takšna študija je pogosto namenjena ženskam v zgodnji nosečnosti, pa tudi v obdobju načrtovanja zanositve.

Med "PCR-12" so poleg zgoraj navedenih bolezni diagnosticirane naslednje bolezni: t

• gonoreja;
• kandidoza;
• bakterijska vaginoza;
• trihomonijaza;
• ureplazmoz;
• herpes tipa 1 in 2.

Glede na laboratorij se lahko seznam preučenih bolezni, vključenih v kompleks, razlikuje. Zdravnik bo v vsakem primeru izbral najprimernejšo možnost pregleda. V vsakem primeru bo celovita analiza s pomočjo PCR trajala veliko manj časa, truda in materialnih stroškov.

PCR diagnoza okužb: kako prenesti?

Priprava na analizo s PCR je v skladu s priporočili o ograji določene vrste materiala:

1. Pri predaji urogenitalnega brisa se je treba tri dni pred načrtovano analizo vzdržati seksa, prenehati jemati antibakterijska zdravila in lokalne mazila, kreme, svečke, nemogoče je izvesti postopek izpiranja. Med menstrualnim tokom se material ne vzame - potrebno je analizirati ne prej kot 3 dni po zaključku menstruacije. 3 ur pred analizo se morate vzdržati uriniranja.
2. Venska kri je bolje darovati zjutraj, na prazen želodec (čeprav to ni pravilo). Na predvečer bi morali omejiti uporabo alkohola in maščobnih živil.
3. Pri jemanju sperme se morate tri dni vzdržati seksa. Priporočljivo je omejiti uporabo alkohola, savne, vroče kopeli.
4. Urin mora vzeti zjutraj, potem ko ste pozorni na genitalije. Bolje je, da se material pobere v posebni sterilni posodi. Gradivo je treba dostaviti v laboratorij v nekaj urah.

Kako dešifrirati rezultat?

Razlaganja rezultatov po PCR diagnosticiranju okužb ni težko. Dekodiranje kvalitativne metode je sestavljeno iz ocenjevanja prisotnosti ali odsotnosti patogena v testnem materialu ter določanja vrste patogena. Če smo v testnem materialu odkrili območje mikrobne DNA, potem se na ustrezni obliki zabeleži pozitiven rezultat in navede tudi, katera vrsta mikrobov je bila določena. V odsotnosti patogena v materialu bo rezultat negativen.

Rezultati kvantitativna analiza na primer, pri diagnosticiranju hepatitisa je treba dešifrirati s standardi, ki jih je določil laboratorij. Ker se merilne enote in kvantitativni dejavnik bistveno razlikujejo v različnih medicinsko-diagnostičnih ustanovah. Zanesljivo, ob upoštevanju vseh povezanih dejavnikov, lahko le dešifrira takšno analizo le zdravnik.

Pregledi laboratorijev

Danes skoraj vsak zasebni laboratorij ponuja storitev, kot je PCR diagnostika okužb.

1. "Invitro" - cena raziskav, ki jih je opravil ta laboratorij, in kakovost so se izkazali ne le v Rusiji, ampak tudi v Ukrajini, Kazahstanu, Belorusiji. Izjave bolnikov pričajo o visoki kakovosti zdravstvenih storitev, hitrih in zanesljivih rezultatih. Toda cenovna politika ustreza visoki kakovosti. Torej, za analizo s PCR za eno okužbo, kot je hepatitis, boste morali plačati približno 700 p. Za pobiranje materialne dajatve je pristojbina - to je še 400r. Kompleksna študija "PCR-6" v tem laboratoriju bo stala veliko manj - ta analiza stane 1445 rubljev, vključuje študije šestih spolno prenosljivih okužb.
2. Helix Lab si zasluži tudi primerne ocene potrošnikov. Sodobne tehnologije in oprema, visoko usposobljeno osebje in primerne cene si zaslužijo pozitivne povratne informacije. Stroški analize za eno okužbo s PCR so 290 str., Dodatno morate plačati za vnos materiala. To plačilo bo odvisno od njegovega tipa od 25 r. (urin) do 550 p. (urogenitalni bris s sekrecijo prostate).
3. Laboratorij Sitilab se razlikuje po tem, da opravi skoraj vsako analizo s PCR čez dan, medtem ko drugi zagotavljajo končni rezultat šele po 2 dneh. Če plačate malo več, lahko odgovor dobite tudi na dan analize. Cenovna kategorija je približno taka: analiza za določanje klamidije stane 230 p., "PCR-6" bo stala 1430 str., In kvantitativna analiza hepatitisa C bo 12650 str. Treba je omeniti, da ta laboratorij predstavlja široko paleto kompleksnih analiz s PCR. To je nedvomna prednost pri diagnosticiranju bolezni.

PCR-diagnostiko izvajamo tudi v državni ambulanti. Opozoriti je treba, da so stroški takšnih analiz nekoliko nižji kot pri raziskavah v zasebnem laboratoriju. Toda oprema in materiali so bistveno drugačni - po tem merilu imajo zasebne klinike očitno korist. Posvetujte se z zdravnikom o izbiri laboratorija za analizo PCR na vašem območju.