Sreda Endo. Sestava in priprava hranilnega medija

Vsak ljubitelj mikrobiologije ve, da je za gojenje katerekoli kolonije potreben ustrezen hranilni medij. Hkrati ima vsak hranilni medij svoje značilnosti, tako v pripravi kot pri uporabi. Če se odločite za gojenje kolonije enterobakterij, boste potrebovali okolje Enda. To je natanko to, o čemer govorimo v tem članku.

Kaj je ta hranilni medij?

Okolje Endo se uporablja za odstranjevanje enterobakterij in ima diferencialni diagnostični značaj. Zakaj se tako imenuje? Je zelo preprosta - poimenovana je po svojem odkritelju - Shigeru Endo. To je znani mikrobiolog japonskega izvora.

Kaj je posebnost tega okolja?

Ni skrivnost, da v mikrobiologiji obstaja koncept gram-pozitivnih in gram-negativnih bakterij. Torej, če se odločite za gojenje kolonije gram-negativnih bakterij, za to potrebujete okolje, ki bo zaviralo rast gram-pozitivnih bakterij. To funkcijo lahko enostavno upravljate v okolju Endo. Zaradi svojih selektivnih lastnosti preprečuje razvoj gram-pozitivnih kolonij.

Srednja sestava

Značilnosti katerega koli okolja so odvisne predvsem od sestavin. Sestava okolja Endo vključuje:

• natrijev sulfat;
• natrijev fosfat;
• mesni peptonski agar;
• magenta;
• natrijev karbonat;
• laktozo.

Zaradi nizkih stroškov v pripravi je okolje Endo veliko povpraševanje med amaterskimi mikrobiologi.

Kakšno je načelo okolja?

Natrijev sulfid in fuksin, ki sta prisotna v njegovi sestavi, prispevata k nastanku Schiffovega reagenta. To pomeni, da bo natrijev sulfid obarval fuksin. Kot posledica te reakcije nastane fuchsulfatna kislina.

Vsi vemo, da enterobakterijske kolonije lahko fermentirajo laktozo, med to reakcijo nastane mravljinčna kislina. Iz kemije je znano, da mravljinčna kislina medsebojno deluje z aldehidi in daje kvalitativno reakcijo. Zaradi tega bo kolonija enterobakterij pobarvana v rožnato-rdečo barvo. Druge gram-pozitivne bakterije (razen enterobakterij) ne morejo okužiti laktoze, zato ne bodo obarvane.

Posledično bodo na petrijevki z medijem Endo izstopale le enterobakterije v obliki škrlatnih palic, ki je rožnate barve. Vse druge kolonije bodo bodisi uničene bodisi ne bodo izstopale na podlagi hranilnega medija.

Kuhanje hranilnega substrata

V mikrobiologiji je okolje Endo eden najpomembnejših hranilnih medijev. Za pripravo takšnega substrata sledite spodnjim navodilom.

1. Kuhanje juha. Vsako meso ali kosti z ostankom mesa bo storilo, morate čim bolj odstraniti maščobo in kite. Meso kuhamo približno 20-25 minut pri 100 stopinjah. Po ohladitvi juhe zamrznite kapljice maščobe.

2. Nastalo brozgo filtrirajte skozi zgoščen bombažni filter do absolutne preglednosti. Omeniti je treba, da filtriranje skozi gazo ni zaželeno, saj obstaja nevarnost, da bi zadeli majhne koščke mesa.

3. Stehtajte preostale sestavine. Pripraviti moramo suho okolje in pripraviti Schiffov reagent. Za to morate pretehtati:

• pepton 1,3 g;
• laktoza 1 g;
• agar 2 g;
• Fuchsin 0,2 g

4. Dodajte fuksin v 30 ml vode, zmešajte fuksin z vodo. Nato dodamo koncentrirano raztopino natrijevega sulfita, dokler barva fuksina ne izgine.

5. Oborina fuksulfatne kisline se obori, pri čemer se ta oborina odstrani s filtracijo.

6. Dodajte vroči medij v vročo juho.

7. Počakajte na raztapljanje in dodajte Schiffov reagent.

8. Nastali substrat se sterilizira približno 30 minut pri temperaturi okoli 125 stopinj.

Rezultati pridelkov morajo ohraniti približno 5 dni, vendar dlje ko jih držite, jasnejši rezultat bodo kolonije bakterij.