Kako se serološki testi uporabljajo za diagnozo?

Serologija (iz latinščine Serum - serum), imenovana znanost o lastnostih krvni serum oseba V nadaljevanju bo predstavljena definicija seroloških reakcij.

Ena od glavnih nalog serologije danes je razvoj metod za izdelavo specifičnih serumov za diagnostiko in zdravljenje, oceno stopnje njihove aktivnosti in določitev mehanizmov izpostavljenosti ljudi. Serološka preiskava krvi je laboratorijska raziskovalna metoda za določanje antigenov ali protiteles (specifičnih beljakovin) v bolnikovem materialu, ki jih vsebuje bolnikov krvni serum. Serološke študije se pri diagnosticiranju nalezljivih bolezni ne štejejo za 100% specifične in občutljive. Zato je vrednotenje rezultatov raziskav mogoče le ob upoštevanju klinične slike celotne bolezni. Strokovnjaki raje uporabljajo natančnejšo diagnozo več testov.

Serološke reakcije - kaj je to?

V laboratorijski diagnozi večine nalezljivih bolezni se uporablja metoda za odkrivanje protiteles, proizvedenih v krvi pacienta v antigenih patogena. V medicinski praksi se uporabljajo že od začetka dvajsetega stoletja. Z razvojem znanosti so se sodobni zdravniki naučili identificirati antigene v strukturi mikrobov in razkrili tudi kemijsko formulo njihovih toksinov. To je omogočilo razvoj serumov, namenjenih ne le za zdravljenje, temveč tudi za diagnosticiranje nalezljivih bolezni. Serum se proizvaja z dajanjem oslabljenih patogenov laboratorijskim živalim. Nastavitev seroloških reakcij je zdaj zelo priljubljena.

Po običajnem času izpostavljenosti se pripravijo preparati iz krvi laboratorijskih živali. Uporabljajo se v seroloških reakcijah za identifikacijo mikroorganizmov ali njihovih toksinov. Metoda temelji na imunskem odzivu človeškega telesa. Ta študija se uporablja pri diagnosticiranju nalezljivih bolezni, da se ugotovi prisotnost ali odsotnost protiteles pri pacientu pred kakršnimi koli virusi ali bakterijami, kot tudi za določitev krvne skupine. Zunanje manifestacije seroloških reakcij so odvisne od pogojev ravnanja in stanja, v katerem so antigeni v krvi bolnika. Če se mikrobi ne raztopijo, se v serumu oborijo, lizirajo, vežejo ali imobilizirajo. Če pride do raztapljanja antigenov, se zazna pojav nevtralizacije ali padavin. Serološke reakcije se že dolgo uporabljajo.

Študijsko gradivo

Pri izvajanju serološke študije z uporabo delcev biološkega materiala, zbranega od pacienta: kri, slina, blato. V številnih primerih se preveri material, zbran v nekaterih okoljskih objektih: voda, zemlja.

Kako natančno se izvajajo serološke reakcije v mikrobiologiji?

Metoda zbiranja biološkega materiala

S to analizo ni potrebno posebej pripraviti pacienta. Vzorci krvi se opravijo zjutraj pred obroki v sobi za zdravljenje zdravstvene ustanove s standardnimi hematološkimi metodami. Za to analizo se odvzame vzorčenje krvi z dvema metodama: venska kri vzame iz kubitalne vene in kapilarno kri vzamemo iz prsta. Material za analizo je v sterilnih zaprtih ceveh.

Kaj je potrebno za določanje seroloških reakcij?

Značilnosti transporta in shranjevanja biološkega materiala

Takoj po zaužitju krvi se transportira v poseben laboratorij, kjer se isti dan pripravi serum. Shranite ga lahko največ štiri ali šest dni v hladilniku pri temperaturi od 2 do 4 stopinje. Če želite serum zadržati dlje časa, je zamrznjen. Da ne bi kršili kakovosti biološkega materiala, lahko zamrzovanje in odmrzovanje opravimo samo enkrat. Dolgotrajno shranjevanje povzroči, da so protitelesa neaktivna in izgubijo nekatere svoje lastnosti. Imunoglobulini razreda M veljajo za najbolj občutljive na nižje temperature shranjevanja.

Ko se sirotka odtali, jo dobro premešamo, da dobimo homogeno sestavo. Pomaga obnoviti koncentracijo protiteles, ki jih vsebuje ta snov.

Serološke študije - za kaj se uporabljajo?

Metoda seroloških reakcij se uporablja za diagnosticiranje ehinokokoze, trihinoze, toksokaroze, opisthorhoze, cisticerkoze, toksoplazmoze, amebijaze, ligardioze. To je potrebno za določitev učinkovitosti predpisanega poteka zdravljenja in za odkrivanje ponovitve bolezni, ki je sledila bolnikovemu okrevanju. Kje je najpogostejša uporaba seroloških reakcij?

Osnovne diagnostične metode

Mikrobiologi in imunologi v večini primerov uporabljajo reakcijo aglutinacije, obarjanja, nevtralizacije, reakcije s sodelovanjem komplementa, z uporabo označenih protiteles in antigenov (radioimunološke, imunofermentalne, imunofluorescentne metode).

Aglutinacijska reakcija (RA)

Serološki aglutinacijski test se izvaja zelo preprosto in hkrati zelo jasno. To vam omogoča, da hitro ugotovite, ali antigeni vsebujejo serum bolnika. Reakcija se uporablja za diagnosticiranje tifus paratifa in tifus. Temelji na specifični interakciji med človeškimi protitelesi (aglutinini) in mikrobi (aglutenogeni). V procesu njihovega medsebojnega delovanja nastajajo delci. To je pozitiven znak. Za reakcijo lahko uporabite žive ali ubite mikrobne snovi, glivice, protozoe, krvne celice in somatske celice. Kemijska študija poteka z ločevanjem na dve stopnji: v prvi fazi se protitelesa zmešajo z antigeni, sledi pa se obarjanje (nastane aglutinat) med reakcijo.

Serološka diagnostična metoda je lahko drugačna.

Reakcijska posredna aglutinacija (RPGA)

Ta reakcija je bolj občutljiva kot prejšnja. Uporablja se za diagnosticiranje bolezni, ki jih povzročajo različne bakterije, intracelularni paraziti, protozoe. Ta analiza lahko zazna koncentracijo protiteles, tudi v zelo majhnih količinah. Za njegovo izvajanje je treba uporabiti prečiščene rdeče krvne celice ovc in človeških rdečih krvnih celic, ki so predhodno obdelane s protitelesi ali antigeni (odvisno od tega, kaj želijo najti v laboratoriju). V nekaterih primerih uporabimo humane imunoglobulinske rdeče krvne celice. Šteje se, da serološka reakcija rdečih krvnih celic poteka, če se rdeče krvne celice oborijo na dnu epruvete. Ko se celice nahajajo v obliki obrnjene kupole in zasedajo celotno dno cevi, to kaže na pozitivno reakcijo. Če se rdeče krvne celice odlagajo v obliki kolone ali gumba na sredini dna, se upošteva negativna reakcija.

Izvajajo serološke teste za sifilis.

Reakcijske padavine (RP)

Za identifikacijo zelo majhnih delcev antigenov se uporablja reakcija obarjanja. To je lahko protein (ali njegov del), spojine beljakovin, lipidov ali ogljikovih hidratov, delno zastopane bakterije in njihovi toksini. Serum za analizo s to reakcijo dobimo z okužbo laboratorijskih živali, ponavadi zajcev. Ta metoda se uporablja za pridobivanje skoraj vsakega obarjalnega seruma.

Mehanizem serološke reakcije precipitacije je po učinkih podoben aglutinacijski reakciji. Protitelesa, ki jih vsebuje serum, zmešamo z antigeni v koloidne raztopine povezovanje z velikimi beljakovinskimi molekulami. Te molekule se odlagajo na dno cevi ali na gelno podlago. Ta različica študije se šteje za zelo natančno in jo lahko uporabimo za odkrivanje celo zanemarljivih odmerkov snovi. Precipitacijska reakcija, ki se pogosto uporablja tudi v forenzični medicini, omogoča diagnosticiranje kuge, tularemije, antraksa, meningitisa.

Takšne reakcije se izvajajo ne samo v tekočem mediju, temveč za to uporabljajo tudi agar gel. Ta postopek se imenuje metoda razpršenih padavin. Omogoča preučevanje kompleksnih antigenskih zmesi. V gelu se protitelesa in antigeni premikajo drug z drugim z različno hitrostjo in po sestanku ustvarijo padavinske linije, po katerih se naredi zaključek.

Kaj je še znana metoda serološke reakcije?

Nevtralizacijska reakcija (PH)

Anti-toksični serumi nevtralizirajo delovanje eksotoksinov, ki jih proizvajajo mikroorganizmi. Ta serološki odziv temelji na tej interakciji. V mikrobiologiji se ta metoda uporablja za titracijo serumov, toksinov in toksoidov ter za določitev njihove terapevtske aktivnosti. Poleg tega lahko s pomočjo te reakcije določite identiteto eksotoksina za določeno vrsto ali tip. Tetanus, difterija in botulizem so diagnosticirani na ta način. Študijo izvajamo na tableti in v substratu za gel.

Za druge teste se uporabljajo tudi serološke reakcije.

Reakcija lize (RL)

Serum, ki vstopa v telo pacienta, je poleg glavne funkcionalne naloge zagotavljanja pasivne imunosti z raztapljivimi lastnostmi. Prispeva k raztapljanju mikrobov, celičnih tujih elementov in virusov, ki vstopajo v pacientovo telo. Glede na sestavo protiteles je serum razdeljen na bakteriolizine, citolizine, spirohetolizine, hemolizine in druge. Ta protitelesa se imenujejo komplimenti. Protitelesa vsebujejo skoraj vse tekočine človeškega telesa, imajo kompleksno beljakovinsko strukturo in so zelo občutljiva na povišano temperaturo, tresenje, izpostavljenost kislini in neposredni sončni svetlobi. Toda v suhem stanju lahko ohranijo svoje lastnosti liziranja do 6 mesecev.

Izvedene so naslednje serološke reakcije te vrste krvi: bakterioliza, hemoliza.

Reakcijo bakteriolize izvajamo s pacientovim serumom in specifičnim imunskim serumom z aktivnimi mikrobi. Če je v krvi dovolj kompleta, bo laboratorijski tehnik opazil lizo bakterij in reakcija bo pozitivna. Druga vrsta serološke reakcije te vrste je, da se bolnikov eritrociti obdelajo z uporabo seruma, ki vsebuje hemolizine, ki se aktivirajo le, če je kompliment. Če je prisoten, bo raziskovalec opazoval raztapljanje rdečih krvnih celic. Ta metoda se uporablja pri izvajanju Wassermanove reakcije (sifilis).

Odziv na zaveze (RSK)

Ta študija se uporablja za odkrivanje protiteles proti okužbi v krvi pacienta in za identifikacijo patogenov s svojo antigensko strukturo. Vse prej opisane reakcije so preproste. CSC je kompleksna reakcija, saj ne vključuje dveh, temveč treh komponent: protitelesa, antigena in komplimenta. Bistvo je v interakciji med protitelesom in antigenom, ki se pojavlja le v prisotnosti komplementnih proteinov, adsorbiranih na vrhu oblikovanega kompleksa AG-AT. Antigeni se po dodajanju kompleta bistveno spremenijo, te transformacije pa kažejo na kakovost reakcije. To je lahko liza, hemoliza, imobilizacija, baktericidno ali bakteriostatično delovanje.

Zgoraj omenjene reakcije se med seboj razlikujejo po tehniki proizvodnje, vendar imajo vse v osnovi reakcijo interakcije antigen-protitelesa in se uporabljajo za njihovo identifikacijo. Obstaja več vrst seroloških reakcij s podobnim načelom delovanja.